Аналіз на ротавірус: діагностика ротавірусної інфекції

Методи діагностики ротавірусної інфекції, експрес-тест в домашніх умовах

Ротавірусна інфекція – це інфекційне захворювання, яке викликається специфічним збудником – ротавирусом. Назва в перекладі з латинської язика означає «вірус у вигляді колеса». Інша назва хвороби – кишковий грип. Діагноз інфекції легко ставиться шляхом лабораторних досліджень калу. Здати аналіз на ротавірус можна в будь-якій лабораторії. Існують різні методики для його виявлення.

Ротавірус передається через брудні руки фекально-оральним шляхом. Його без утруднень можна виявити в калі у дітей. Паразитує виключно в епітелії тонкого кишечника. Джерело інфекції – людина.

Клініко-діагностичний метод

Діагноз ротавірусної інфекції поставити за симптомами неможливо. Можна лише припустити про розвиток цього захворювання. У визначенні розвитку будь-якої інфекційної хвороби важливий збір анамнезу (опитування). Лікар зобов’язаний докладно з’ясувати, як розвивалася хвороба у дитини:

  • коли батьки вперше відмітили погіршення стану малюка;
  • якими були перші ознаки, етіологія – гострий початок або поступовий розвиток;
  • з’ясування ймовірного джерела інфекції, механізм зараження і шляхи передачі інфекції.

Правильний збір епідеміологічних даних дозволить припустити зародження і розвиток інфекції.

Ознаки, характерні для ротавірусу:

  • у 95% випадків хворіють діти від 6 місяців до 2 років;
  • інкубаційний період до 4 днів;
  • початок хвороби – однократна блювота і незначне підвищення температури
  • потім розвивається дуже рідкий, водянистий стілець;
  • в калових масах ніколи не містяться домішки крові.

Правила забору калу на ротавірусну інфекцію

Для того щоб результати дослідження були максимально достовірними, необхідно зібрати калові маси слідуючи певним правилам. У немовлят кал на ротавірус збирають з підгузника після спорожнення кишечника.

Якщо дитина вже користується горщиком, то перед тим як посадити малюка, потрібно провести дезінфекцію. Для цього горщик обдають окропом кілька разів. На його стінках не повинно залишитися слідів синтетичних миючих та знешкоджуючих засобів.

Кал необхідно зібрати відразу після дефекації чистим шпателем, якщо стілець рідкий, можна просто вилити вміст горщика в ємність для відправки в лабораторію. Загальний обсяг калових мас не повинен перевищувати 20-30 мл. Тара для біологічного матеріалу повинна щільно закриватися кришкою.

Для дослідження необхідно забирати ту частину калу, де найбільше міститься патологічних домішок – слиз, фібринові плівки, гній, підозрілі частинки. Чим швидше зібрати аналіз кала на ротавірус і відправити його в лабораторію, тим достовірніше буде результат.

Методи дослідження калових мас на ротавірус

Ротавірусну інфекцію діагностують кількома способами. Їх мета – визначення самого вірусу, антигенів до нього, виявлення вірусної РНК. Серологічні методи дозволяють поставити точний діагноз за один день.

За темою:  Озонатор повітря: шкода чи користь для організму людини

РЛА – реакція латекс-аглютинації

Це вид серологічної діагностики, який широко застосовують при інфекційних хворобах. Заснований на реакції антиген-антитіло. Для цього застосовують спеціальний антиген, який представлений суспензією мікроорганізмів, чутливих еритроцитів і частинок латексу. При взаємодії суспензії з антитілами утворюється комплекс, який випадає в осад, що свідчить про наявність ротавірусної інфекції.

ІФА – імуноферментний аналіз

Аналіз на реакцію антиген-антитіло складається з двох етапів. Спочатку відбувається ферментативна реакція, потім – імунну відповідь. Принцип методу зв’язування антитіла з антигеном.

На спеціальному пристрої сорбуються антитіла. Потім з ними зв’язуються цільові антигени. Це все промивається спеціальним розчином. Потім наносяться антитіла, позначені специфічним ферментом. Роблять ще одну промивку. Формується комплекс з антигену і двох антитіл. Потім вміст фарбують. Чим інтенсивніше колір у зразку, тим більша кількість ротавірусу знаходиться в калових масах.

Иммуноелектронная мікроскопія

Це реакція нейтралізації вірусів, яка проводиться для їх ідентифікації, а також для серологічної діагностики вірусних інфекцій. Принцип такого тестування заснований на розвитку в організмі імунних реакцій при зараженні.

Для оцінки клітинних реакцій проводять тести клітинної токсичності лімфоцитів щодо інфекційних агентів. Визначають здатності лімфоцитів на відповідну реакцію. Так ідентифікуються противірусні антитіла. Реакція робиться шляхом змішування невідомого вірусу з антисивороткой.

Інші методи діагностики ротавірусу

Вибір методів діагностики залежить від кожного конкретного випадку. Для лабораторних досліджень забирають кал і кров. Основні діагностичні способи визначення інфекції:

  • РДП – реакція дифузної преципітації.
  • Твердообразная реакція коагглютинации.
  • РПГ – реакція пасивної аглютинації.
  • Імунофлюоресцентний аналіз.
  • Радиоиммуний аналіз.
  • Виділення вірусу в культурі клітин.
  • ПЛР – полімеразна ланцюгова реакція.
  • Електрофорез ротавірусної РНК.
  • Метод точкової гібридизації.
  • РГГА – реакція гальмування гемаглютинації.
  • РНГА, реакція непрямої гемаглютинації.
За темою:  Киснева пінка: користь і шкода для дітей і дорослих

Диференціальна діагностика

Диференціальний тест на ротавірусну інфекцію проводять тим пацієнтам, у яких є інші гострі кишкові інфекції (бактеріальні та вірусні). Така діагностика показана тоді, коли в симптоматиці на перший план виходять ознаки гастроентериту:

  • харчові токсикоінфекції;
  • холера;
  • гостра дизентерія;
  • вірусна діарея – аденовірус, астровирус, ентеровіруси ЕСНО та коксакі, вірус норфолк;
  • сальмонельоз;
  • ешеріхіоз.

Визначення ротавірусної інфекції в домашніх умовах

Якщо потрібно зробити терміновий аналіз або провести діагностику самостійно (у випадку, якщо стан дитини задовільний і не потребує госпіталізації), роблять тест на ротавірус в домашніх умовах. Він не трудомісткий і вимагає мінімальних тимчасових витрат. З його допомогою можна 100% визначити наявність патогенного мікроорганізму в калових масах.

Иммунохроматографический експрес-тест на ротавірус заснований на застосуванні моноклональних та поліклональних мишачих антитіл до вірусного антигену. Антитіла з’єднані з барвником і розташовані на мембрані тестовій касети. Тест має високу ступінь специфічності і чутливості.

Що входить до складу тест-системи:

  • касети для тіста – 20 шт.;
  • одноразові піпетки – 20 шт.;
  • пластикові пробірки, що містять по 2 мл екстрагента, – 20 шт.;
  • аплікатори для забору матеріалу – 20 шт.;
  • інструкція по використанню тест-системи.

Не можна використовувати систему, якщо порушена цілісність її упаковки або закінчився термін придатності. Під час проведення тесту користуватися одноразовими рукавичками.

Кал для дослідження береться тільки після прояву симптомів хвороби. Найбільш точні результати дослідження бувають на 3-5 день захворювання.

Приготування екстрагованої проби: відкрити пластмасову пробірку і з допомогою аплікатора внести в неї кал розміром з горошину, потім щільно закрити і струшувати до повного розчинення калу в екстрагентів. Потім пробірка повинна відстоятися до того часу, поки великі частинки не осядуть на дно. Для проведення тесту реагент повинен бути кімнатної температури.

За темою:  Вівсяне масло: користь і шкода, як його приймати

Як проводиться тест: дістати з упаковки касету, відкрити пробірку з біоматеріалом. За допомогою піпетки в лунку для проб капнути 6 повних крапель, поступово даючи вбиратися кожної попередньої краплі. Максимальний час, скільки готується результат, становить 10 хвилин.

Оцінка результату:

  • одна смужка в районі контрольної зони (З) – результат негативний, кал не містить ротавірус;
  • одна кольорова смужка в контрольній зоні і одна смужка (чітко помітна) в тестовій зоні – результат позитивний, в пробі міститься ротавірус;
  • якщо в контрольній зоні відсутня смуга – тест невизначений, виконаний неякісно, з порушенням інструкції, необхідно провести повторний аналіз з використанням іншої тест-касети.

Тест підходить тільки для визначення ротавірусної інфекції в калових масах. Якщо у випорожненнях міститься кров, це може дати хибнопозитивний результат.

Ротавірусної інфекцією хворіє 100% населення в дитячому віці. Небезпека ця патологія представляє тільки для немовлят і дітей до 3 років. Для дитини вона небезпечна такими ускладненнями, як сильне зневоднення і ураження нервової системи, судоми, аж до зупинки дихання. Тому важлива своєчасна і точна діагностика ротавірусу, її диференціація з іншими інфекційними хворобами.

MAXCACHE: 0.89MB/0.00872 sec