Лабораторна діагностика ботулізму: диференціальна та мікробіологічна

Діагностика ботулізму

Ботулізм – гостре інфекційне захворювання, що викликається граммположительной бактерією Clostridium botulinum. Мікроорганізм виділяє токсин, який вражає нервову систему шляхом блокування ацетилхолінових рецепторів нервових волокон. Внаслідок цього розвивається параліч різних м’язів. Порушення дихання, ковтання, міокардит при ботулізмі можуть стати причинами смерті.

Зараження найчастіше відбувається при вживанні в їжу зіпсованих консервів, що містять ботулотоксин або спори бактерій. У вигляді спор мікроорганізм здатний тривалий час зберігатися в несприятливих умовах. Під впливом високих температур клостридії гинуть.

Перебіг захворювання та розвиток ускладнень залежать від вираженості симптомів і своєчасності специфічної терапії. 20-70% випадків ботулізм призводить до летального результату.

Біологічна проба

Метод дозволяє визначити наявність ботулотоксину в біологічних рідинах хворого. Для цього контрольній групі лабораторних тварин (щурів, мишей або морським свинкам) внутрішньочеревно вводять фільтрат досліджуваного матеріалу.

Друга група тварин отримує разом з матеріалом протиботулінічні сироватки, третьої вводять фільтрат, попередньо гретий до 100 0С протягом 30 хв. Діагноз вважається встановленим, якщо миші, які отримали необроблений фільтрат, гинуть внаслідок паралічу. Створення другої експериментальної групи необхідно для того, щоб визначити тип токсину.

Бактеріологічна проба

Для визначення збудника біоматеріал поміщають в живильне середовище і культивують:

  • для бактерії типів A, B, C, D, F оптимальна температура становить 30-40 0С,
  • для серовару Е – 25-370С,
  • для серовару G – 30-370С.

Краще всього вирощувати клостридії в м’ясних середовищах з рН 7,3-7,6. Для культур бактерій властивий різкий запах згірклого масла. Колонія мікроорганізму має неправильну форму з численними відростками і відгалуженнями. В агарі колонії виглядають як грудочки вати з ниткоподібними відростками. На желатинових середовищах бактерії спочатку формують круглі прозорі колонії, які потім дають шиповидні відростки, стають бурими, мутніють. У бульйоні вони виглядають як компактні утворення на дні, а сама рідина знебарвлюється.

Одиночна бактерія має вигляд палички з закругленими кінцями довжиною 4,4-8,6 мкм і завширшки 0,3-1,3 мкм. Клостридії поліморфні, іноді зустрічаються дуже короткі або довгі і тонкі бактерії. Забарвлюються вони по Граму. Спори бактерій мають форму тенісної ракетки.

Мікробіологічна діагностика ботулізму шляхом посіву калових мас хворого на живильне середовище може давати похибку, так як у кишечнику людини живуть вегетативні форми клостридій, які мають схожі культуральні ознаки. Тому рекомендується поєднувати бактеріологічну пробу з іншими методами діагностики.

Імунодіагностика

Застосування імуноферментного аналізу дозволяє проводити швидку діагностику ботулізму. Матеріалом для дослідження є венозна кров. Імунологічні тести відрізняються високою точністю.

Суть методу полягає в тому, кров додають мічені ферментами антитіла. Вони вступають в реакцію з бактеріальними антигенами, утворюючи імунні комплекси. При цьому змінюється активність ферментів і відповідно колір зразка. Потім лаборанти вимірюють інтенсивність забарвлення. Порівнюючи результат з контрольними даними, вони роблять висновок про наявність чи відсутність у крові специфічних антитіл до ботулотоксину.

Метод дот-иммуноанализа

Цей аналіз на ботулізм проводиться шляхом нанесення досліджуваного матеріалу на нітроцелюлозний мембранний фільтр, що містить мічені протиботулінічні антитіла. Потім фільтр обробляють проявником. Якщо в біологічних рідинах хворого перебував токсин, то ділянки, на які наносили пробу, потемніють. Рівень інтоксикації визначають, порівнюючи результат з контрольною шкалою.

Переваги методу полягають у швидкості – проведення аналізу вимагає не більше 3 годин, і можливості досліджувати на зараженість ботулізмом не тільки біоматеріали людини, але і харчові продукти.

Особливості діагностики ботулізму

Диференціальна діагностика ботулізму утруднена на початку захворювання, коли у хворого спостерігаються симптоми отруєння: блювання, діарея, загальна інтоксикація організму. Але ці ознаки швидко змінюються неврологічними розладами. На початковому етапі хвороби запідозрити ботулізм може досвідчений лікар при огляді.

Необхідно проводити диф. діагностику ботулізму з такими патологіями:

  • міастенія,
  • дерматоміозит,
  • дифтерійний поліневрит,
  • вірусний енцефаліт,
  • гостре порушення мозкового кровообігу,
  • синдром Гійєна-Барре,
  • поліомієліт,
  • отруєння атропіном,
  • синдром Верніке – нестача вітаміну В1,
  • отруєння грибами.

Основні критерії, за якими можна визначити ботулізм:

  • збереження свідомості;
  • відсутність лихоманки;
  • симетричні прояви паралічу;
  • порушуються тільки рухові функції, чутливість зберігається в нормі;
  • не змінюється склад ліквору;
  • не уражається психіка.

Велике значення має анамнез хворого. Якщо за кілька днів до перших симптомів чоловік вживав в їжу гриби, домашні консерви, копчену або в’ялену рибу, не можна відкидати можливість зараження клостридиями. Інкубаційний період захворювання варіює від декількох годин до 2-3 днів, але рідко триває довше доби.

Ознакою, що дозволяє безпомилково діагностувати ботулізм, є присутність у крові, сечі, калі, блювотних масах бактеріального токсину.

Додатково проводиться загальний аналіз крові та сечі. Результати дослідження є неспецифічними, але допомагають оцінити тяжкість стану хворого.

Лабораторна діагностика ботулізму включає дослідження калових мас, промивних вод шлунка, блювотних мас, крові, сечі і залишків харчових продуктів. Сучасні методи дозволяють своєчасно і з високою точністю визначити захворювання.

За темою:  Яблуко і кориця для очищення організму

MAXCACHE: 0.38MB/0.00039 sec